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Practica Determinación de grasas


Introducción:

Los lípidos, junto con las proteínas y carbohidratos, constituyen los principales componentes estructurales de los alimentos.
Los lípidos se definen como un grupo heterogéneo de compuestos que son insolubles en agua pero solubles en disolventes orgánicos tales como éter, cloroformo, benceno o acetona, contienen carbón, hidrógeno y oxigeno, y algunos también contienen fósforo y nitrógeno.

Estos compuestos comprenden un grupo de sustancias que tienen propiedades comunes y similitudes en la composición, sin embargo algunos tales como los triacilgliceroles son muy hidrofóbicos. Otros, tales como los di y monoacilgliceroles tienen movilidad hidrofóbica e hidrofílica en su molécula por lo que pueden ser solubles en disolventes relativamente polares. (1)



El contenido en lípidos libres, los cuales consisten fundamentalmente de grasas neutras y de ácidos grasos libres, se puede determinar en los alimentos por extracción del material seco y reducido a polvo con una fracción ligera del éter di-etílico en un aparato de extracción continua. Se dispone de éstos en numerosos diseños, pero básicamente son de dos tipos. El más común y utilizado es el de tipo Soxhlet que dá una extracción intermitente con un exceso de disolvente reciente condensado. La eficiencia de este método depende tanto del pre-tratamiento de la muestra como de la selección del disolvente. Un procedimiento útil para la extracción de grasas de alimentos húmedos y semisólidos, que impiden el desecado inicial, es mezclar la muestra con sulfato de calcio, sulfato de sodio anhidro o con vermiculita. Cuando la muestra se hace pulverulenta y seca, se transfiere a un cartucho de Soxhlet en un aparatodeextracción.



Fundamento del método de análisis:

Se considera grasa al extracto etéreo que se obtiene cuando la muestra es sometida a extracción con éter etílico. El término extracto etéreo se refiere al conjunto de  sustancias extraídas que incluyen, además de los ésteres de los ácidos grasos con el glicerol, a los fosfolípidos, las lecitinas, los esteroles, las ceras, los ácidos grasos libres, los carotenos, las clorofilas y otros pigmentos. El extractor utilizado en el siguiente método es el Soxhlet, un extractor intermitente, muy eficaz, pero tiene la dificultad de usar cantidades considerables de disolvente.

El equipo de extracción consiste en tres partes: el refrigerante, el extractor propiamente dicho, que posee un sifón que acciona automáticamente e intermitente y, el recipiente colector, donde se recibe o deposita la grasa.

El mecanismo es el siguiente: al calentarse el solvente que se encuentra en el recipiente colector, se evapora ascendiendo los vapores por el tubo lateral, se condensan en el refrigerante y caen sobre la muestra que se encuentra en la cámara de extracción en un dedal o paquetito. El disolvente se vá acumulando hasta que su nivel sobrepase el tubo sifón, el cual se acciona y transfiere el solvente cargado de materia grasa al recipiente colector. Nuevamente el solvente vuelve a calentarse y evaporarse, ascendiendo por el tubo lateral quedando depositado el extracto etéreo en el recipiente colector. El proceso se repite durante el tiempo que dure la extracción en forma automática e intermitente y así la muestra es sometida constantemente a la acción del solvente.





Ventajas de este método:
  • Utilizar el mismo disolvente.
  • Recuperación del disolvente.
  • Proceso continuo.
  • Económico



La extracción tiene lugar en tres etapas:
1ª Etapa:
• Vertido del disolvente en el cuerpo del soxhlet donde
se encuentra el cartucho con las limaduras de hierro.
2ª Etapa:
• Separación del aceite del resto del sólido.
3ª Etapa:
• Recuperación por separado del disolvente y de residuos. (2)



Procedimiento:

Transferir 2.0 g de muestra finamente dividida en el cartucho o dedal; cubrir con una
porción de algodón.

Colocar el cartucho dentro del extractor Soxhlet. En la parte inferior ajustar un matraz
con cuerpos de ebullición (llevados previamente a peso constante por calentamiento a
100 – 110°C).

Colocar el refrigerante.

Añadir éter por el extremo superior del refrigerante en cantidad suficiente para tener 2 ó 3 descargas del extractor (alrededor de 80 ml).
Hacer circular el agua por el refrigerante y calentar hasta que se obtenga una frecuencia de unas 2 gotas por segundo.

Efectuar la extracción durante 4 a 6 horas. Suspender el calentamiento, quitar el extractor del matraz y dejar caer una gota de éter del extractor a un papel o vidrio de reloj, si al evaporarse el éter se observa una mancha de grasa, ajustar el Soxhlet de nuevo al matraz y continuar la extracción.

Evaporar suavemente el éter del matraz y secar a 100°C hasta peso constante. (3)

(1)  Bayley, 1990
(2)  Muñoz, 1981
(3)  Kirk, 1996

Diagrama de flujo:



Método de Soxhlet 


 Pesar de 2-5g de muestra, en el cartucho y colocar un tapón de algodón o fibra de vidrio.



Colocar el cartucho en el extractor.



Colocar en la parte inferior el matraz de fondo plano (esta en peso constante).



Adicionar aproximadamente un volumen de 80ml para tener un 2 a 3 descargas del solvente.



Abrir la llave del refrigerante y conectar la fuente de calor.



Realizar la extracción de 4 a 5hrs, suspender el calentamiento, recibir una gota del extractor (en un vidrio de reloj o en un papel filtro), si no deja mancha al evaporarse proceda a destilar.



Colocar matraz de bolo en estufa a 80°C durante 30min., enfriar y pesar.





Método de Gerber 



 Colocar con cuidado en el butirómetro de Gerber 10 ml de Ac. Sulfúrico, 10.94ml de leche y 1ml de alcohol amílico.



Colocar el tapón, envolver el butirómetro en un trapo húmedo, mezclar con movimientos oscilatorios y lentos.



Centrifugar a 110rpm por 4min.




Transferir el butirómetro con el tapón hacia abajo, a un baño de agua por 3min.


Leer el % de grasa directamente en la escala. 






Resultados:

Tabla 1
Por equipo:

Matraz vacío
Peso de la muestra
Matraz con grasa
%
81.9969
2.0151
82.1805
9.1
79.9345
1.0922
80.0800
13.3217
98.3799
1.1187
98.5113
12.19
111.5845
1.0149
111.7291
14.24


Posibles razones de error en la práctica:
  • Matraz frío
  • Tocar el matraz con las manos grasas y no limpiarlo
  • No tomar valores adecuados al registrar el peso de la muestra

Los resultados de la tabla 1, se obtienen de la siguiente fórmula:

%= Peso del matraz con grasa – Peso del matraz vacío
      ----------------------------------------------------------------------      x 100
                               Peso de la muestra


Peso del matraz: 7909345     
Matraz con grasa: 80.0800
Peso de capsula: 2.3420
Peso de la muestra: 1.0922
% extracto etéreo = (B-A)  *100peso de la muestraB= matraz de bola con la grasaA= matraz debola a peso constante inicial


% extracto etéreo = (80.0800-79.9345) * 100      = 13.3217                                                                                     1.0922                                                                                                                                                                                       


Discusión
En general podemos observar que los valores obtenidos variaron, esto  se debe a que hubo fallas en el método, ya sea durante el pesado o la extracción. La muestra analizada fue tomada de “un solo lote” por lo que los datos no deberían de variar significativamente.
Obtuvimos 13.3217% de extractoetereo  comparado con la NMX F-376-S-1980 para “galletas marias” nos dice que el valor no  está en el rango ya que nos indica un máximo de 8% de grasa, Las especificaciones se refieren a muestra sobre base seca.
La muestra obtenida presentaba un color amarillo  probablemente por la presencia de colorantes artificiales o naturales solubles  en éter.

Conclusión:
Se realizó el extracto mediante método gravimétrico, la grasa se separó de la harina por extracción con solvente orgánico que luego fue recuperado.

Bibliografía:

  • Bayley,A.E, “aceites y grasas industriales”, Ed.Reverté, pp. 422-
  • 424,458-466. 1990.
  • Bermejo, “Química analítica general, cuantitativa e instrumental”, Ed.Paraninfo, pp. 384-386,427-436, 1996.
  • Cauthemoc Muñoz,M, “Métodos de separación. Prácticas de instrumentación analítica. Parte III”, Ed.Limusa, pp. 77-78, 1981.
  • Kirk, Othmer, “ Enciclopedia de tecnología química”,Ed Limusa, p





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