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Practica Oxidación de grasas y aceites


Introducción.

Las grasas y los aceites son susceptibles a diferentes reacciones de deterioro que reducen el valor nutritivo del alimento y además producen compuestos volátiles que generan olores desagradables.  Debido q que el enlace éster de los acilgliceroles es susceptible a hidrólisis química o enzimática y a que los ácidos grasos insaturados son sensibles a reacciones de oxidación.
Las reacciones de oxidación de los lípidos tienen diversos orígenes el principal es la acción directa del oxígeno sobre las dobles ligaduras de los ácidos grasos insaturados, con la consecuente generación de hidroperóxidos. Otro mecanismo es la acción enzimática de la  lipoxigenasa y de la alcohol-deshidrogenasa
 Este tipo de rancidez se presenta comúnmente en lípidos con un alto contenido de ácidos grasos insaturados y es el deterioro más común de las grasas utilizadas en la industria de los alimentos. Los ácidos grasos insaturados no son los únicos constituyentes de los alimentos que se oxidan: los compuestos que imparten olor, sabor y color al igual que algunas vitaminas (A, C, D, E y K) también son propensos a la oxidación. La oxidación de lípidos insaturados puede generar diversos compuestos, que van desde sustancias polimerizadas hasta moléculas volátiles de bajo peso molecular que producen olores y sabores en el alimento.
La intensidad y la forma de oxidación, y los compuestos formados dependen en gran parte de las condiciones de oxidación (temperatura, presencia de catalizadores, estado de la dispersión de la grasa, radiaciones electromagnéticas, tipo e ácido graso distribución y geometría de las dobles ligaduras y cantidad de oxigeno disponible).  La actividad de agua juega un papel muy importante en la velocidad de oxidación de los ácidos grasos, esta aumenta de manera proporcional a su grado de insaturación. Las temperaturas altas aceleran considerablemente la oxidación, especialmente por encima de los 60°C de manera que la velocidad de oxidación se duplica por cada 15°C de aumento en la temperatura. Las contaminaciones con metales de transición como el cobre o el hierro son muy dañinos ya que se pueden iniciar las reacciones de oxidación, el efecto catalítico de estos metales es mayor en presencia de ácidos grasos. La luz ultravioleta puede igualmente iniciar estas reacciones. La aeración aumenta el contacto del oxígeno con la grasa, lo que acelera la oxidación.
Para retardar el proceso de oxidación, existen sustancias llamadas antioxidantes que se encuentran en la naturaleza, pero a su vez también existen antioxidantes “químicos” o sintéticos que son los que se utilizan en la industria de los alimentos para retardar la aparición de los malos olores y la descomposición por esta reacción de los alimentos.



Objetivo.
Utilizando diferentes métodos, se determinará la rancidez producida por la oxidación  de la grasa de coco.

Metodología.
Método de Kreis (Índice de rancidez).

5 ml de aceite en el tubo con 5 ml de fluoroglicinol 0.1% agitar tubo fuertemente
Reposar 10 minutos, observar colores 
Hacer diluciones: muestra de aceite mas petrolato 1:9 por duplicado 

Interpretación de resultados:
Color rojo= Sin rancidez
Reacción positiva sin diluir = No rancidez (se pondrá rancia en poco tiempo).
Reacción positiva en la primer dilución 1:9 = Rancidez perceptible.
Reacción en la segunda dilución = Rancidez definitiva.



Determinación del valor de peróxido o índice de peróxido.

En matraz erlenmeyer 250 ml, pesar 4 g de muestra+25 ml de acido acetico glaciar/cloroformo (3:2 v/v). Agitar
Adicionar 1 ml de KI saturada, agitar y reposar 1 min
Agregar 50 ml de agua+almidon como indicador 
Titular con tiosulfato de sodio 0.01 N

IP=((P-T)(N)(1000))/M

Donde:

 P= ml gastados de tiosulfato de sodio.
T= ml de tiosulfato de sodio gastados en el testigo
N= Normalidad del tiosulfato de sodio.
M= Peso de la muestra en gramos.



Prueba de ácido tiobarbitúrico.

Pesar 0.5 g en vaso de 10 ml + 20 ml de 1-butanol, aforar a 100 ml 
En un tubo de ensayo adicionar 5 ml de la mezcla + 20 ml de TBA
Calentar el tubo a 90 °C en baño maría 120 min
Enfriar y medir absorvancia 530 nm. Con testigo 

Valor de Ac tiobarbiturico= ((50*(absorvancia problema-absorvan cia blanco))/peso de la muestra en mg

La absorbancia del testigo no debe exceder 0.1.

La absorbancia del testigo blanco medida de acuerdo al procedimiento, pero sin la  porción de muestra deberá no exceder 0,1. Si se excede, una nueva solución del  reactivo deberá ser preparada usando TBA de mayor pureza. En el caso de  blancos reactivos mayores de 0,1, el alto valor para el blanco puede ser debido a  impurezas en el 1-butanol
Algunas substancias presentes en la muestra podrían reaccionar con el TBA para formar otros complejos coloridos o productos de reacción para los cuales la absorbancia no está a 530 nm . Esto puede ser reconocido por otro tono del color obtenido.




Resultados
Método de Kreis.

Método cualitativo.

Muestra
Resultado
Sin diluir
Positivo
Dilución 1:9
Positivo
Dilución 1:19
Negativo

En la dilución 1:9 la reacción fue positiva, es decir, se presentó una coloración roja, pero en la dilución 1:19 fue negativa. Lo que indica una rancidez apenas apreciable en el olor y sabor del aceite.
Para el primer método en la valoración de índice de peróxidos según Wilkinson, R. J. una coloración rosa o roja en la capa inferior de ácido se considera indicativa de enranciamiento,la cantidad de esta es (aunque no exactamente)es proporcional al color, para la muestra que se utilizó, en este caso grasa de coco, la coloración fue muy poco perceptible lo que nos indica que la grasa no estaba en condiciones de descomposición por oxidación.
Índice de peróxidos.
EN el método que nos indica la cantidad de peróxidos formados en la grasa debido a diferentes factores ya expuestos anteriormente, los resultados obtenidos fueron los siguientes:
Según la fórmula

= 2.5 meq de o2/ gramo de grasa.
Y según la FAO.
• Índice de peróxidos meq O2/kg de grasa           máx. 5 para grasas 10 para aceites
Entonces, para el caso en cuestión el índice de peróxidos se encuentra dentro de los parámetros, y la grasa puede ser usada nuevamente para cocinar alimentos.

Prueba de ácido tiobarbitúrico.
Absorbancia
Blanco      0.03
Problema  0.278
Peso de la muestra 0.97g
Valor del acido barbitúrico= 50(Absorbancia del problema-Absorbancia del blanco)
                                                             Peso de la muestra en mg

Valor del acido barbitúrico= 50(0.278-0.03) =1278.3505
                                                           0.0097

La absorbancia del testigo no excedió el 0.1


Conclusiones.

Los métodos de valoración para el deterioro de las grasas son una  técnica de mucha ayuda, ya que nos indican cuales son las condiciones en las que se encuentra una grasa o una aceite después de ser utilizado y sometido a diversos procesos, y con esta información poder seguir utilizándolos o frenar su uso para poder reemplazarlo. A nivel industrial es más común que se realicen estas prácticas para cumplir con las especificaciones establecidas en las normas asignadas para cada producto, pero en pequeños negocios no se cumplen con estos requerimientos y es frecuente consumir alimentos preparados con aceites o grasas que muestran a simple vista una oxidación elevada.

Recomendaciones

Para la fabricación de cualquier producto es muy recomendable conocer los ingredientes que lo conforman y cómo estos se comportan después de algún proceso, en este caso los aceites después del freído, saber cuántas veces es recomendable reutilizarlo para evitar daños a la salud de los consumidores.



Cuestionario:

1.- ¿Qué son los ácidos grasos y como se presentan en los lípidos?
Tradicionalmente, los ácidos grasos se definieron como ácidos monocarboxílicos de cadena alifática con número par de átomos de carbono, que podían ser saturados o insaturados; sin embargo, en la medida en que las técnicas de análisis cualitativo y cuantitativo mejoraron, se identificaron muchos otros con estructuras diferentes. Generalmente se encuentran esterificados integrando los triacilglicéridos, los cuales constituyen prácticamente el 100% de las grasas y aceites, que a su vez constituyen los lípidos más abundantes.
2.- ¿Cuáles son los ácidos grasos más abundantes en el aceite de coco?
Ácido láurico, ácido mirístico, ácido palmítico, ácido oléico, ácido cáprico y ácido caprílico.
3.- ¿Por qué no es conveniente refrigerar los aceites?
Porque se puede afectar negativamente el sabor del aceite.
4. Describe el mecanismo de reacción de la rancidez oxidativa.
Las reacciones de oxidación de los lípidos tienen diversos orígenes; el principal es la acción directa del oxígeno sobre las dobles ligaduras de los ácidos grasos insaturados con la consecuente producción de hidroperóxidos. Otro mecanismo es la acción enzimática de la lipoxigenasa y de la alcohol deshidrogenaza. Por parte de los grumos hemo de la mioglobina y la hemogloblina, inducen  de igual manera a la formación de hidroperóxidos a través de reacciones catalizadas por los iones hierro que contiene dentro de su molécula.

5.  ¿Qué métodos se utilizan para determinar la estabilidad de grasas y aceites?
El Método de Kreis. Se basa en la producción de color rojo cuando del fluoroglucinol reacciona con la grasa oxidada en solución acida.
Acidez. Este método mide la cantidad de ácidos grasos libres en la materia grasa; de acuerdo a esto, se estima la cantidad de muestra a analizar.
Índice de peróxido. Se fundamenta en la en la transformación de la solución de yoduro de potasio a yodo en proporción a la cantidad se peróxidos presentes en los lípidos.
Índice de peróxidos, aparato de Sully.
Determinación de peróxidos por el método rápido de Lea. La muestra se mezcla con una mezcla de Ácido acético y cloroformo y se añade ioduro potásico el peróxido de oxígeno libera el iodo de KI luego se valora con tiosulfato.
Valor de p- anisidina. Se basa principalmente en la detección de compuestos carbonílicos.
Determinación de contenido ácidos grasos libres.

6. ¿Es el cambio de color en un aceite un indicativo de la rancidez de aceites vegetales? ¿Por qué?
El termino rancidez se usa para describir los diferentes mecanismos a través de los cuales se alteran los lípidos y se han dividido en dos grupos: lipólisis o rancidez hidrolítica y autoxidación o rancidez oxidativa; la primera se debe básicamente a la acción de las lipasas que liberan ácidos grasos de los triacilgliceridos, mientras que la segunda se refiere a la acción del oxigeno y de las lipoxigenasas sobre las insaturaciones de las ácidos grasos.
En el caso de los aceites vegetales (soya, cacahuate, maíz, etc.), los ácidos grasos liberados por la lipasa son de más de 14 átomos de carbono, poco volátiles y por lo tanto no se perciben por el olfato; su presencia solo se puede advertir mediante la determinación del índice de acidez y de otras características. Por la formación de hidroperóxidos que son coloridos se puede detectar la rancidez de los aceites.

7. ¿Qué diferencia hay entre grasa, manteca y aceites?
Tanto las grasas como los aceites son sustancias oleaginosas, grasientas o de cera, que flotan en el agua y no se disuelven en ella. La simple diferencia entre estas dos es que las grasas son sólidas y los aceites se presentan en estado líquido pero a nivel molecular son muy similares.Por otro lado la manteca proviene de origen animal, y la grasa puede venir de fuente tanto animal o vegetal, un ejemplo claro sería la mantequilla es animal, entonces se le considera manteca, el aceite de oliva proviene de la aceituna esa se le llama grasa.

 8. ¿Qué es la rancidez oxidativa y la rancidez hidrolítica?
Las grasas y los aceites pueden sufrir muchas alteraciones que reducen las propiedades nutricionales y además producen compuestos volátiles que proporcionan sabores y olores desagradables, todo esto debido a que el enlace éster de los acilglicéridos es susceptible a la hidrólisis química y enzimática y a que los ácidos grasos insaturados son sensibles a las reacciones de oxidación.
El termino rancidez se utiliza  para describir diversos mecanismos que  deterioran los lípidos. Estos son lipólisis o rancidez hidrolítica que se debe a la acción de las lipasas que liberan ácidos grasos de los triacilgliceridos.
La rancidez oxidativa tiene un mecanismo implica el mecanismo de un radical libre en donde el oxígeno se adiciona a la cadena de un ácido graso de un triglicérido provocando la formación de peróxidos. La reacción de autoxidación puede iniciarse y ser catalizada por la presencia de calor, luz, iones de metales divalentes y enzimas como la lipoxigenasa. Los peróxidos formados no contribuyen a los sabores y olores característicos de la rancidez por la oxidación de lípidos, pero una vez formados son inestables y se transforman en compuestos de peso  molecular más bajo y que son los responsables del grado de rancidez que se presenta.

9. ¿Porque es importante la oxidación en los lípidos?
 La oxidación de los ácidos grasos es un mecanismo muy importante para la obtención de energía metabólica (ATP) por parte de los organismos aerobios. Dado que los ácidos grasos son moléculas muy reducidas, su oxidación libera mucha energía; en los animales, su almacenamiento en forma de triacilgliceroles es más eficiente y cuantitativamente más importante que el almacenamiento de glúcidos en forma de glucógeno.
La beta oxidación  de los ácidos grasos lineales es el principal proceso productor de energía, pero no el único. Algunos ácidos grasos, como los de cadena impar o los insaturados requieren, para su oxidación, modificaciones de la β-oxidación o rutas metabólicas distintas. Tal es el caso de la alfa oxidación, la w-oxidación o la oxidación peroxisomicas.
En alimentos la oxidación de los lípidos es muy importante puesto que la vida de anaquel de los productos lanzados al mercado puede verse disminuida si dicha oxidación es muy elevada, es por eso que este tipo de oxidación es muy controlada para evitar que se produzca.

10. ¿Qué otros índices conoces para determinar la calidad de grasas y aceites y en qué consisten?
Punto de humo: El punto de humo de un aceite o grasa desciende a lo largo del proceso de fritura, debido a la formación de ácidos grasos libre y otros compuestos de menor peso molecular que los triglicéridos. El seguimiento de los valores de este parámetro puede ser también un buen sistema para controlar el avance de la alteración global. Tiene la ventaja de ser una determinación sencilla que no requiere instrumental específico. En la práctica no debería aparecer humo en un aceite o grasa a temperaturas menores a 170°C.
Espuma: una formación excesiva de espuma en un aceite durante la fritura que no se disipa ni se dispersa es un indicativo de que el aceite debe ser eliminado o desechado. La espuma puede llegar a ser un peligro para la seguridad del manipulador de alimentos.
Viscosidad: conforme los aceites y grasas se van deteriorando su viscosidad va aumentando debido a la formación de compuestos de alto peso molecular (polimerización). Se puede utilizar densímetros o viscosímetros para determinar estos cambios en el producto.
Determinación de material polar total: utilizando un equipo portátil de medición de polares se debe de introducir el sensor de medición en el aceite, hasta una profundidad que se indica en el mismo equipo de medición y se realiza una lectura directa. Si el resultado de polares, es superior al 25%, el aceite deberá descartarse inmediatamente.

11. Analizar los resultados obtenidos en los procedimientos, compare con bibliografía:
Ver discusión de resultados.

12. Discuta las limitaciones de cada método.
Uso excesivo de reactivos de alta toxicidad.
Tiempo muy prolongado para llevar a cabo la reacción.

13.-Que significa el periodo de inducción
Caracteriza la resistencia de las grasas y aceites a la oxidación.  Adicionalmente al término periodo de inducción se utiliza la expresión: Índice de Estabilidad Oxidativa o por sus siglas en inglés OSI (OilStabilityIndex). El método Rancimat también es conocido como “Prueba rápida de estabilidad oxidativa” y es de uso generalizado en la actualidad como una versión automatizada del método AOM (Active OxigenMethod) que es extremadamente complicado. (13.1)

14.- ¿Que es lipoxidasa? Indique ventajas y desventajas que tiene su presencia en sistemas alimentarios
La lipoxidasa cataliza específicamente la oxidación de los grupos metilenos de ácidos grasos insaturados como linoleico, linolénico y araquidónico y sus ésteres, a los respectivos peróxidos
Ventajas
Es la digestión de las grasas durante la germinación.
Al triturar se desencadena la acción liposidica y los aceites se hidrolizan
 Los peróxidos formados por las lipoxidasas son muy buenos suministradores de oxigeno


Desventajas

Puede  incluso oxidar nuevas moléculas de ácidos grasos insaturados, siendo, por lo tanto, una nueva fuente de enranciamiento.
¿Que otros métodos se usan para determinar el grado de oxidación?
Índice de peróxidos
Prueba del acido butírico
Índice de yodo
Espectrofometria indirecta
Evaluación sensorial
Métodos cromatográficos.





Bibliografía:
E. Bailey Alton Aceites y grasas industriales  Editorial reverte S.A. Barcelona España 1984 Pág. 50
A Barreiro José A, J. Sandoval B. Aleida Operaciones de conservación de alimentos por bajas temperaturas Editorial Equinoccio 2006 2da Edición  Madrid España Pág. 53
H. Carlos, R. Herrera, V. bolaños Nuria, C. Giselle Lutz Química de alimentos Manual de laboratorio Primera edición 2003
http://www.meic.go.cr/reglatec/consulta/modificacion-aceites-grasas.pdf
Wilkinson, R. J. col.(1990) Cosmetología de Harry. Ed Diaz de Santos.
BADUI, Dergal Salvador. Química de los alimentos. Alhambra Mexicana. México. 1990. 648 pág.
NMX-F-014-SCFI-2006. Alimentos. Aceite comestible puro de coco- especificaciones.
Pearson D. (1993), Técnicas de laboratorio para el análisis de alimentos. Ed. Acribia , S. A.

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